组织切片最新视觉报道_《切片》全过程(2024年12月全程跟踪)
荧光原位杂交实验全攻略:步骤与技巧 实验步骤: 探针变性:将探针放入75℃的恒温水浴中温育5分钟,然后立即放入0℃的冰水中5~10分钟,使双链DNA探针变性。 切片处理:将切片置于65℃下过夜烘烤。 脱蜡与复水:在二甲苯中室温脱蜡2次,每次10分钟,然后浸入100%乙醇中5分钟。接着将切片依次放入100%乙醇、85%乙醇和70%乙醇中各两分钟复水,再浸入去离子水中3分钟,用无绒纸巾吸取多余的水分。 处理组织切片:在50℃下用30%酸性亚硫酸钠处理组织切片20~30分钟。 漂洗:在2XSSC溶液中漂洗2次,每次5分钟。 蛋白酶K处理:取0.4ml蛋白酶K储存液(20mg/ml)溶于40ml 20XSSC(pH 7.0)得到蛋白酶K工作液(200ⵧ/ml);将组织切片浸泡在蛋白酶K工作液中,37℃下孵育20-30分钟。 再次漂洗:在2XSSC溶液中漂洗2次,每次5分钟。 酸处理:将组织切片置于0.1M HCl中室温浸泡5-10分钟,然后在2XSSC溶液中漂洗2次,每次5分钟。 脱水:将组织切片依次置于-20℃预冷的70%乙醇、85%乙醇和100%乙醇中各2分钟脱水。 丙酮处理:将组织切片室温浸入丙酮溶液中2分钟。 干燥与加热:自然干燥玻片,加热玻片至56℃。 杂交:将已变性或预退火的探针10 滴于已变性并脱水的玻片标本上,盖上18㗱8盖玻片,用Parafilm封片,置于潮湿暗盒中37℃杂交过夜(为防止杂交液蒸发,此过程在湿盒中进行)。 洗涤:将已杂交的玻片标本放置于已预热42~50℃的体积分数50%甲酰胺/2㗓SC中洗涤3次,每次5 min。然后在已预热42~50℃的1㗓SC中洗涤3次,每次5 min。 干燥与复染:自然干燥玻片,DAPI复染。 观察结果:用荧光显微镜观察结果。 实验诀窍: 前期固定对FISH的结果影响很大,固定不足会导致信号可能丢失,如果固定过长,会难以消化背景高。 酶消化:消化组织上的蛋白质利于杂交,降低背景。不足会导致信号弱,组织界限不清。过度会导致细胞破碎,信号丢失。 变性不足:温度和时间不够,杂交信号差。 杂交不足:温度不够会导致杂交信号差,杂点多。 干燥:封片不好,液体蒸发,会导致背景高,信号差。 湿度过高:湿条水分过多会导致信号差。
病理实验常见问题解答 Q1:组织切片为什么会出现叠片或无法展开的情况? Q2:在做IHC或IF时,为什么片子边缘会出现颜色过深或过亮的情况? Q3:为什么选择能做IF的抗体,但在石蜡切片上却做不出免疫荧光? Q4:肝脏、肾脏、脑等组织的自发荧光为什么较强?如何避免这种情况? Q5:常见的非特异性表达有哪些? Q6:同一来源的一抗能否用于荧光二标或多标?其原理是什么? Q7:为什么多标荧光会出现串色现象? Q8:石蜡切片和冰冻切片哪种更适合做免疫荧光? Q9:为什么有时石蜡切片的IHC和IF无法做出阳性结果? Q10:为什么同样的抗体在WB实验中能做出阳性,而在IHC(或IF)实验中却无法做出阳性?
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젤子生物学检验技术全解析 第四章第二节 课堂笔记 分子生物学检验技术是现代医学检验的重要手段,通过特定的实验方法,可以检测和分析生物样品中的核酸、蛋白质等生物大分子。以下是详细的实验方法和注意事项。 Southern印迹技术 Southern印迹技术是分子生物学中的经典方法,用于检测特定DNA序列。通过电泳分离DNA,然后转移到膜上,再与探针进行杂交,从而确定特定序列的存在。 Western印迹技术 Western印迹技术主要用于检测蛋白质。通过SDS-PAGE电泳分离蛋白质,转移到膜上,再与特异性抗体进行杂交,最终通过显色反应检测蛋白质的存在。 原位杂交技术 𑊥位杂交技术是一种在细胞或组织水平上检测特定核酸序列的方法。通过将标记的探针与细胞或组织切片中的核酸进行杂交,可以在显微镜下观察到特定序列的位置和表达情况。 DNA芯片技术 DNA芯片技术是一种高通量的基因检测方法。将大量的DNA片段有序地固定在固体支持物上,然后与标记的样品进行杂交,通过检测杂交信号的强度,可以同时检测多个基因的表达情况。 蛋白质芯片技术 蛋白质芯片技术是用于检测蛋白质相互作用和功能的一种方法。通过将蛋白质固定在芯片上,与标记的配体进行反应,可以分析蛋白质之间的相互作用关系。 影响实验的因素 銦⩒的选择:探针的特异性和标记方法对实验结果有重要影响。 探针的浓度:过高或过低的浓度都会影响杂交效果。 反应时间:反应时间过长或过短都会影响杂交效率。 温度:杂交温度的选择对实验结果有重要影响。 通过这些实验方法和注意事项的了解,可以更好地掌握分子生物学检验技术的原理和操作技巧,为临床诊断和治疗提供更准确的依据。
宝宝的新玩具:达尔文显微镜探索世界 宝宝们总是对新鲜事物充满好奇,喜欢用手触摸、用嘴巴尝试。为了满足他们的好奇心,同时避免细菌入侵,我给她准备了一个科学罐头达尔文显微镜,让她变身小小科学家,尽情探索这个世界。 这款显微镜小巧便携,重量仅40克,可以轻松携带。它可以将物体放大120倍,搭配12种载玻片,将需要观察的组织切片放在载玻片上,通过调节倍数和焦距,宝宝就可以开始探索微观世界了。 科学罐头HIBL达尔文显微镜集成了1台立式显微镜、1台便携式显微镜和1台手机显微镜的功能。台式使用时,宝宝可以像科学家一样工作;手持观察则特别适合户外探索,随时随地探秘微观世界;手机使用更是方便,只需将显微镜夹子固定在手机上,对准摄像头即可拍摄记录分享微观世界。 现在宝宝拿到任何东西都要用显微镜观察一下,真的是一个好奇宝宝!
油红O染色:揭示脂肪的秘密 在科研和病理诊断中,油红O染色是一种非常有用的技术,它能够特异性地显示组织内的脂肪。这种染色方法利用油红O作为脂溶性染料,由于其高度溶解于脂肪中,甘油三酯等中性脂肪会被染色。 油红O染色的主要目的是揭示组织内的脂肪分布和含量。它在脂质代谢研究、疾病诊断等方面有着广泛的应用。通过这种染色方法,科学家们可以更好地理解脂肪在细胞和组织中的分布情况,从而深入研究脂质代谢的机制。 在病理诊断中,油红O染色可以帮助医生更准确地诊断某些疾病,如脂肪肝、动脉粥样硬化等。通过观察染色后的组织切片,医生可以直观地看到脂肪的分布和形态,从而做出更准确的诊断。 总之,油红O染色是一种非常实用的技术,它在科研和病理诊断中发挥着重要作用。通过这种染色方法,我们可以更好地了解脂肪在人体内的分布和代谢情况,为疾病的研究和诊断提供有力的支持。
乳腺癌FISH检测的含义是什么 ᤹FISH检测全称为荧光原位杂交技术检测,是一种分子遗传学检测方法,用于评估乳腺癌细胞中特定基因的异常情况。FISH检测通过检测HER2基因的扩增情况,帮助医生确定患者是否适合接受针对HER2的靶向治疗,从而为患者提供更为个体化的治疗方案。劤 FISH检测的含义是指一种用于检测乳腺癌细胞中HER2基因是否发生扩增的分子生物学检测方法。这种检测有助于判断乳腺癌的生物学特性,为患者提供更加精准的治疗选择。⚠ 乳腺癌FISH检测的步骤通常包括以下几个环节:⊱、样本采集:通过手术、细针穿刺或空心针活检等方式获取乳腺癌组织样本。늲、样本处理:将采集到的组织样本进行处理,制作成可供检测的切片。 3、FISH探针标记:使用特定的荧光标记探针,这些探针与HER2基因序列互补。、杂交:将标记好的探针与组织切片上的DNA进行杂交,探针会与目标HER2基因结合。 5、检测与分析:使用荧光显微镜观察切片,分析探针的荧光信号,判断HER2基因是否扩增。 患者需要到正规医院进行检查,在检查后还需要注意一些事项,那么接下来请看我的图3内容。 #乳腺癌#
什么是生物学良恶性? 生物学这个概念普通人很少了解,而癌症的本质在于生物学良恶性。癌症首先一个关键词在细胞,早先,许多人认为肿瘤是一种通过某种方式植入患者体内的异己物,而现在,随着组织病理学的发展,通过对正常组织切片和肿瘤组织切片进行比较发现,肿瘤组织也和其它正常组织一样,是由大量的细胞构成的。癌症第二关键词中克隆,肿瘤可以起源于单克隆,或者多克隆。癌症的本质是机体发生混乱,生物学秩序崩溃的疾病。生物学是一个微观概念, 但生物学的检查对于我们预防癌症极其重要。#肺癌七抗# #肺结节抽血查七抗# #肺结节血液检查# #肺癌自身抗体#
【「重庆这项技术全国领先」,「未来癌症早诊早治早筛靠它了」】10月22日,重庆。一张片子能展示1000+基因,为癌症的早诊早治早筛提供新的一个依据。金凤实验室2024年度科技成果发布:可以在大尺度范围的组织切片上,实现上千个基因的原位检测和可视化,更早更准确地捕获到突变细胞的存在。@重庆广电第1眼重庆广电第1眼的微博视频
石蜡切片常见问题及解决方法(下) 5. 切片碎烂或组织与石蜡分离 组织脱水不彻底,透明度不够。需要根据组织的大小和厚薄调整脱水、透明时间。 浸蜡时间过长或温度过高。根据组织的性质和结构调整浸蜡时间,控制包埋温度。 脱水、透明时间不足,或组织中含有乙醇等,导致石蜡不易渗入组织。应重新熔化,退回入二甲苯和酒精,再进行包埋。 二甲苯使用时间过长,应更换二甲苯。 切片皱褶太多且不能展开 蜡太软或室温过高。可以将蜡块放入冰箱中冰冻后切片,并在切片时一边切片一边用冰块冰冻或换蜡。如果室温过高,可以开空调降低室温。 切片刀上粘有残余的石蜡,刀口不干净。可以用棉花沾少许二甲苯将刀口拭干净。 组织浸蜡时间不够,或脱水、透明不够。可以重复浸蜡过程。 切片刀不锋利。应将切片刀磨锐利再行切片。 材料发生裂隙破碎或脱落 脱水不够彻底,无法弥补。 有透明剂残留,可以增加浸蜡时间,重新包埋。 石蜡渗入时,温度过高或时间过长,无法弥补。 脱水剂和透明剂使组织变硬发脆,可以用正丁醇、叔丁醇和二氧六环等进行脱水和透明。 材料太硬或太粗,可以在蜡块表面涂一薄层火棉胶溶液。
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